产品货号：
GL2300
中文名称：
EX Taq DNA聚合酶
英文名称：
EX Taq DNA Polymerase
产品规格：
500U|1000U
发货周期：
1～3天
产品价格：
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EX Taq DNA聚合酶是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶，其基因来源于Thermus aquaticus polymerase，该蛋白分子量为94kDa，具有5'→3'DNA聚合酶活性和5'→3'外切核酸酶活性，无3'→5'外切核酸酶活性，扩增得到的PCR产物3'端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。本制品具有延伸速度快、扩增效率高的特点，保真性高于普通Taq DNA聚合酶，主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验。
| 组分 | 500U | 1000U |
| EX Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 100μL | 200μL |
| 10×EX Taq PCR Buffer | 1mL | 2×1mL |
保存：-20℃，有效期1年。
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃ 30分钟内，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位。
- 经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
- 经检测无外源核酸酶活性；
- PCR方法检测无宿主残余DNA；
- 能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；
- 室温存放一个月，无明显活性改变。
- 一般退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
- 延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本制品EX Taq DNA聚合酶的扩增效率为1kb/30s。
3可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重；在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。 - 避免反复冻融，否则效率会降低；10×EX Taq PCR Buffer可以分装成小份使用。
- 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
- 配制PCR反应体系
成分 用量 终浓度 10×EX Taq PCR Buffer 5μL 1× dNTP预混液(各2.5mM) 4μL 各200μM 正向引物(10μM) 2μL 0.4μM 反向引物(10μM) 2μL 0.4μM 模板DNA <1μg EX Taq DNA聚合酶(5U/μL) 0.5～1μL RNase-Free水 至50μL - 引物浓度请以终浓度0.1～1.0μM作为设定范围的参考，扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度。
- 本制品的10×EX Taq PCR Buffer中含镁离子(MgCl2 20mM)，无需单独配制。
- 引物浓度请以终浓度0.1～1.0μM作为设定范围的参考，扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度。
- 配置PCR反应条件
步骤 温度 时间 循环数 预变性 94℃ 2min 1 变性 94℃ 30s 25～35 退火 54～65℃ 30s 延伸 72℃ 30s 终延伸 72℃ 2min 1
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